普魯士藍染色實驗代測

普魯士藍染色簡介：

在酸性條件下，切片內的高鐵鹽與亞鐵作用生成亞鐵氰化鐵（普魯士藍反應）。

鐵反應是用來鑒別組織或細胞內出現的黃棕色色素是屬于哪一種色素，入黑色素、脂褐素、甲醛色素還是含鐵血黃素。

染色步驟（僅供參考）：

1、石蠟切片脫蠟至水；

2、蒸餾水洗兩次；

3、取等量2%亞鐵氫化鉀和2%鹽酸混合，染色30~45min；

4、蒸餾水洗，0.1%核固紅復染3min（染液用一段時間后調整為5min）；

5、無水乙醇脫水（兩缸各5分鐘）；

6、正丁醇30s；

7、二甲苯透明（兩缸各5min）， 中性樹膠封片（封片過程中保證組織上的二甲苯不能干，否則在高倍顯微鏡下觀察易出現小水珠結晶）。

染色結果：

含鐵血黃素呈藍色，胞核呈紅色。

注意事項：

1、組織應采用緩沖中性甲醛液固定，若用一般的甲醛液，則應作短時間固定后即包埋切片，經甲醛液固定的組織反應不良。

2、鹽酸以分析純較好，因粗制鹽酸內含有較多的鐵，可導致假陽性。

3、在操作過程中容器要干凈，避免使用鐵制工具（可用不繡鋼制工具）。

4、鐵反應前的各步驟以蒸餾水沖洗，以防自來水內的鐵離子與組織內的鈣鹽結合產生假陽性反應。

5、制作對照片時，取另一張相同連續切片脫蠟至水，置入5%的草酸中作用2~6小時，即可將含鐵血黃素溶去，再染普魯士藍，鐵反應陰性。

普魯士藍染色實驗代測