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Tris-磷酸電泳緩沖液(10×TPE） 提供優(yōu)惠高品質(zhì)試劑
產(chǎn)品名稱： Tris-磷酸電泳緩沖液(10×TPE）
規(guī)格：500ml
用途：電泳緩沖液,常用于RNA凝膠電泳
注意事項(xiàng)：主要由900mM的Tris-磷酸、20mM EDTA、DEPC處理水組成。
儲(chǔ)存條件：室溫,12個(gè)月
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Tris-磷酸電泳緩沖液 提供優(yōu)惠高品質(zhì)試劑
蛋白質(zhì)生物合成過(guò)程:
1.氨基酸的活化與搬運(yùn):氨基酸的活化以及活化氨基酸與tRNA的結(jié)合,均由氨基酰tRNA合成酶催化完成。反應(yīng)完成后,特異的tRNA3’端CCA上的2’或3’位自由羥基與相應(yīng)的活化氨基酸以酯鍵相連接,形成氨基酰tRNA。
2.活化氨基酸的縮合——核蛋白體循環(huán):活化氨基酸在核蛋白體上反復(fù)翻譯mRNA上的密碼并縮合生成多肽鏈的循環(huán)反應(yīng)過(guò)程,稱為核蛋白體循環(huán)。核蛋白體循環(huán)過(guò)程可分為三個(gè)階段:
⑴起動(dòng)階段:①30S起動(dòng)復(fù)合物的形成。在IF促進(jìn)下,30S小亞基與mRNA的起動(dòng)部位,起動(dòng)tRNA(t RNAfmet),和GTP結(jié)合,形成復(fù)合體。②70S起動(dòng)前復(fù)合體的形成。IF3從30S起動(dòng)復(fù)合體上脫落,5 0S大亞基與復(fù)合體結(jié)合,形成70S起動(dòng)前復(fù)合體。③70S起動(dòng)復(fù)合體的形成。GTP被水解,IF1和IF2
從復(fù)合物上脫落。
⑵肽鏈延長(zhǎng)階段:①進(jìn)位:與mRNA下一個(gè)密碼相對(duì)應(yīng)的氨基酰tRNA進(jìn)入核蛋白體的受位。此步驟需G TP,Mg2+,和EF參與。②成肽:在轉(zhuǎn)肽酶的催化下,將給位上的tRNA所攜帶的甲酰蛋氨酰基或肽酰基轉(zhuǎn)移到受位上的氨基酰tRNA上,與其α-氨基縮合形成肽鍵。給位上已失去蛋氨酰基或肽酰基的tRNA從核蛋白上脫落。③移位:核蛋白體向mRNA的3'- 端滑動(dòng)相當(dāng)于一個(gè)密碼的距離,同時(shí)使肽酰基tRNA從受體移到給位。此步驟需EF(EFG)、GTP和Mg2+參與。此時(shí),核蛋白體的受位留空,與下一個(gè)密碼相對(duì)應(yīng)的氨基酰tRNA即可再進(jìn)入,重復(fù)以上循環(huán)過(guò)程,使多肽鏈不斷延長(zhǎng)。
⑶肽鏈終止階段:核蛋白體沿mRNA鏈滑動(dòng),不斷使多肽鏈延長(zhǎng),直到終止信號(hào)進(jìn)入受位。①識(shí)別:RF 識(shí)別終止密碼,進(jìn)入核蛋白體的受位。②水解:RF使轉(zhuǎn)肽酶變?yōu)樗饷?多肽鏈與tRNA之間的酯鍵被水解,多肽鏈釋放。③解離:通過(guò)水解GTP,使核蛋白體與mRNA分離,tRNA、RF脫落,核蛋白體解離為大、小亞基。
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